BOD五日生化測定儀基于水體中微生物分解有機物的生化過程，通過測定五日培養(yǎng)前后的溶解氧變化，計算生化需氧量（BOD5），其測定方法需遵循嚴格的操作流程，確保微生物活性與反應(yīng)條件穩(wěn)定。

樣品預(yù)處理是測定的基礎(chǔ)環(huán)節(jié)。首先需調(diào)節(jié)水樣 pH 值至 6.5-7.5，若水樣酸性或堿性過強，需用稀鹽酸或氫氧化鈉溶液中和，避免 pH 值異常抑制微生物活性。隨后進行水樣稀釋，根據(jù)預(yù)估 BOD5 濃度選擇合適稀釋倍數(shù) —— 若濃度未知，需設(shè)置 3-4 個稀釋梯度，稀釋水需提前經(jīng)曝氣充氧（溶解氧濃度≥8mg/L），并加入磷酸鹽緩沖液、硫酸鎂等營養(yǎng)鹽，維持微生物代謝所需環(huán)境。稀釋過程需緩慢攪拌，避免產(chǎn)生氣泡，稀釋后的水樣溶解氧需保持在 7-8mg/L，若溶解氧不足需再次曝氣補充。

培養(yǎng)測定需嚴格控制環(huán)境條件。將稀釋后的水樣分裝至培養(yǎng)瓶，裝滿后溢出部分水樣以排除瓶內(nèi)空氣，立即加蓋密封，防止外界氧氣進入。同時準備空白樣（僅含稀釋水），與水樣同步處理。將培養(yǎng)瓶放入 BOD 測定儀的恒溫培養(yǎng)箱，設(shè)置溫度為 20℃±1℃，培養(yǎng)周期為 5 天。部分儀器采用壓力傳感法，通過監(jiān)測培養(yǎng)瓶內(nèi)壓力變化（微生物耗氧導(dǎo)致壓力下降）直接記錄數(shù)據(jù)；傳統(tǒng)容量法需在培養(yǎng)前后分別測定水樣溶解氧，培養(yǎng)前測定需在分裝后 1 小時內(nèi)完成，培養(yǎng)后需避免光照干擾，測定時輕緩操作防止瓶內(nèi)氧氣與外界交換。

數(shù)據(jù)計算需按標準公式執(zhí)行。壓力傳感法儀器可自動計算 BOD5 值，無需手動干預(yù)；容量法需先計算水樣與空白樣的溶解氧差值，再扣除空白消耗，結(jié)合稀釋倍數(shù)得出結(jié)果。計算公式為：BOD5（mg/L）=（水樣培養(yǎng)前后溶解氧差值 - 空白差值）× 稀釋倍數(shù)。若多個稀釋梯度均有有效數(shù)據(jù)，需選擇溶解氧消耗在 2mg/L 以上且剩余溶解氧≥1mg/L 的梯度計算，取平均值作為最終結(jié)果。計算完成后需驗證數(shù)據(jù)有效性，空白樣 5 天溶解氧消耗應(yīng)≤0.5mg/L，否則說明稀釋水受污染，需重新測定。

測定過程中需注意微生物活性維護，若水樣含殺菌劑等抑制物質(zhì)，需加入馴化后的微生物菌種或延長馴化時間；若水樣為工業(yè)廢水，需提前進行預(yù)處理去除毒性物質(zhì)。培養(yǎng)期間需確保儀器恒溫系統(tǒng)穩(wěn)定，避免溫度波動影響微生物代謝速率。通過規(guī)范執(zhí)行預(yù)處理、培養(yǎng)及計算步驟，BOD 五日生化測定儀可準確反映水體中可生物降解有機物的含量，為水質(zhì)污染評估提供可靠依據(jù)。